摘要:
目的 观察替洛非班对不同剪切力诱导血小板聚集的抑制效果,为临床不同血流动力学环境下形成血栓情况提供用药参考。 方法 采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷( polydimethylsiloxane, PDMS)-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用不同浓度替洛非班体外孵育后,分别以 11、52 μL/ min 的入口条件流过直微通道和 80% 狭窄微通道 150 s,直通道中 11、52 μL/ min 时壁面剪切率分别为 300、1 500 s-1,80% 狭窄通道中 11、52 μL/ min 时最大壁面剪切率分别为 1 600、7 500 s-1。 用显微镜拍摄荧光标记血小板在玻璃表面的黏附聚集图像,并用 Image J 分析荧光图像。 以血小板表面覆盖率作为血小板聚集行为的量化指标,计算不同剪切率条件下替洛非班抑制血小板的半抑制率浓度(IC50 )。 流式细胞仪检测以 52 μL/ min 流过 80% 狭窄微通道后全血中血小板活化指标(CD62P,PAC-1)。 结果 替洛非班抑制血小板聚集具有剂量依赖性,且抑制效果与剪切率相关。 在 11、52 μL/ min 条件下,直通道内浓度达 100 nmol / L 时,聚集几乎完全被抑制;80% 狭窄通道内浓度达 1 μmol / L 时,聚集几乎完全被抑制。 直通道中 11、52 μL/ min 时 IC50 分别为 2. 3、0. 5 nmol / L;80% 狭窄通道中 11、52 μL/ min 时 IC50分别为 20. 73、4. 5 nmol / L。 病理性高剪切力可诱导血小板活化,替洛非班可抑制该活化行为。 结论 替洛非班可有效抑制剪切力诱导的血小板聚集,临床实践中应根据不同剪切力环境下形成的血栓给予不同浓度替洛非班治疗。
