2022, 37(3):433-440.
摘要:
目的 从生物物理学与免疫学交叉角度，分析二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid, EPA）、二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid, DHA）对鼠源树突状细胞（dendritic cells, DCs）生物物理学特性、细胞骨架及迁移能力的影响，探讨ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 polyunsaturated fatty acids, ω-3 PUFAs）对DCs免疫功能的影响及其潜在作用机制。方法 分离C57BL/6J小鼠骨髓来源单核细胞，经20 ng/mL重组鼠集落刺激因子（recombinant mouse granulocyte macrophage colony stimulating factor, rmGM-CSF）和10 ng/mL重组鼠白介素-4（recombinant mouse interleukin-4, rmIL-4）诱导分化为未成熟树突状细胞（immature dendritic cells, imDCs），第6天加入100 ng/mL脂多糖诱导为成熟树突状细胞（mature dendritic cells, mDCs），进一步对imDCs及mDCs进行形态学观察及CD11c阳性率分析；通过细胞增殖检测试剂盒（cell counting kit-8, CCK-8）及流式细胞仪检测不同浓度EPA和DHA（浓度均为0~60 μmol/L）作用下DCs细胞活力及凋亡情况；在确定最佳作用浓度后分别通过荧光偏振法、细胞电泳法及浓度梯度法检测分析DCs的膜流动性、电泳迁移率（electrophoretic mobility, EPM）及渗透脆性变化，并用免疫荧光法检测其细胞骨架纤维状肌动蛋白（filamentous actin, F-actin）表达，最后利用Transwell系统检测DCs迁移能力。结果 imDCs及mDCs的CD11c阳性率均在80%左右；不同浓度EPA和DHA均呈剂量依赖性降低DCs细胞活力，但并没有诱导其凋亡。在50 μmol/LEPA和DHA作用下，DCs生物物理学特性均发生改变，其中渗透脆性和EPM明显下降，膜流动性明显增大。DCs细胞骨架F-actin含量表达均明显上升，迁移率显著下降。结论 ω-3 PUFAs可能会通过改变DCs细胞骨架结构及生物物理学特性，抑制细胞迁移能力，进而影响其免疫功能。
