2017, 32(3):205-212.
摘要:
目的 探讨Rho相关卷曲蛋白激酶1（rho-associated coiled-coil containing protein kinase 1, ROCK1）及其相关信号分子在感受张应变机械刺激、调控血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）增殖功能中的作用。方法 应用张应变加载系统对体外培养VSMCs施加牵张幅度10%、频率1.25 Hz生理性周向张应变；Brdu检测VSMCs增殖水平；Western blotting检测力学加载后VSMCs的ROCK1表达水平以及蛋白激酶C（protein kinase C, PKC）α/β II、蛋白激酶D（protein kinase D, PKD）、胞外信号调节激酶（extracellular regulated protein kinase, ERK）磷酸化水平；采用RNA干扰技术（RNA interference, RNAi）检测ROCK1对VSMC增殖和PKCα/βII、PKD、ERK磷酸化的调控作用。结果 10%生理性张应变加载12、24 h显著抑制VSMCs的ROCK1表达，并显著抑制PKD和ERK的磷酸化；10%生理性张应变加载12 h显著抑制PKCα/βⅡ 的磷酸化，但加载24 h PKCα/βⅡ 的磷酸化与静止对照组相比无显著差异。RNAi抑制VSMCs的ROCK1表达后，VSMCs增殖水平显著降低，同时PKCα/βⅡ 和PKD磷酸化水平显著降低，但ERK磷酸化无明显变化。结论 10%生理性张应变可能通过抑制ROCK1表达调控PKCα/βⅡ 和PKD的磷酸化水平，从而影响VSMCs增殖，维持血管稳定性。探讨张应变力学刺激调控血管细胞功能的细胞内信号转导网络，对心血管生理和疾病病理机制研究具有一定意义。
