2017, 32(2):122-129.
摘要:
目的 探讨高重力对前成骨细胞MC3T3-E1形态和成骨功能的影响。方法 将MC3T3-E1细胞按不同高重力分为对照组、5 g组、10 g组、15 g组、20 g组,实验组每次加载30 min连续加载3 d,对照组同步置于除g值外相同的环境中。鬼笔环肽染色考察细胞骨架蛋白形态;ALP活性检测试剂盒检测ALP含量;实时定量PCR检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ, ColⅠ)、骨钙素(osteocalcin, OC)、runt相关转录因子(runt-related transcription factors, Runx2)的基因表达;Western blot 检测ColⅠ、OC蛋白表达。结果 高重力条件下成骨细胞胞体变薄,细胞表面积明显增大;细胞骨架排列结构变得疏松、松散,微丝肌动蛋白束状结构减少,微丝呈弥散状,有序性降低。成骨分化相关指标ALP、ColⅠ、OC、Runx2的基因均显著上调;ColⅠ和OC蛋白亦呈现高表达。对照组茜素红染色只有极少量面积很小的桔红色结节,高重力加载后各组细胞明显形成面积大小不一的桔红色结节。结论 高重力下成骨细胞可通过骨架结构发生重排引起细胞形态的改变,并近一步通过上调分化相关基因和蛋白表达,有效刺激成骨细胞成熟分化。