摘要:目的 研究生理性流动条件下血小板在玻璃表面的聚集行为,以期建立一种简易的流动条件下血小板聚集功能分析的新模型。方法 采用基于感光干膜的软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷(PDMS)-玻璃微通道芯片。将抗凝人外周全血以300s-1和1500s-1的生理性流动壁剪切率流过的微通道芯片,倒置荧光显微镜拍摄荧光标记血小板在微通道底部玻璃表面形成的血小板聚集体荧光图像,通过图像分析得到血小板聚集体数量、平均尺寸、表面覆盖率和平均荧光强度。分别对玻璃表面进行氧等离子亲水性处理、牛血清白蛋白封闭和胶原蛋白修饰处理,调整血液样品红细胞比容(Hct),用不同的抗血小板制剂处理血液样品,观察上述不同实验条件下血小板在玻璃表面的聚集情况;比较分析健康人群和糖尿病患者的血小板聚集情况。结果 流动条件下血小板在玻璃表面发生聚集形成三维血小板聚集体,血小板聚集依赖于剪切率大小、玻璃表面亲疏水性和Hct;血小板聚集主要由血小板膜糖蛋白GPIIb/IIIa-纤维蛋白原和ADP-P2Y12受体通路调控;血小板在玻璃表面的聚集能够反映糖尿病患者血小板的高活性状态。结论 流动条件下血小板在玻璃表面的聚集与流动条件、蛋白吸附和血小板自身活化状态相关。本文提供了一种无需额外的黏附蛋白修饰的微流控血小板聚集功能分析的新模型。